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使用膜再生液可以对同一张膜进行多次 Western Blot检测。在室温条件下，将用过的膜浸泡在膜再生液 10～60分钟，可在不影响抗原蛋白的情况下清除膜上结合的抗体。随后，可以使用不同的抗体进行下一轮 Western Blot实验。适宜从少量样品多次检测不同蛋白质。即使样品量并不匮乏，采用这一策略多次检测同一 张膜上的蛋白，能省去给药处理、蛋白电泳和膜转移等耗费性步骤。而且可以消除重新上样而带来的误差， 使可比性更强。

膜再生液特点：无毒无味无害，室温下使用，可对同一张膜进行5次以上的Western Blot 检测。

应用：清除硝酸纤维素膜或 PVDF膜上结合的抗体，不影响抗原蛋白。

使用方法：
1. 将膜充分浸泡于适当体积的再生液中，室温洗脱 10～20分钟，时间长短应该参考注意事项进行优化， 洗脱某些抗体需较长时间，更有长达60分钟之久。
2. 取出膜，用洗涤液(如 TBST等)漂洗两次。
3. 此时膜上抗体已除去，可重新封闭后再加入另一种抗体进行检测。

注意事项：
1. 膜再生液实质是在不影响膜上结合的抗原的条件下将抗体洗脱下来，实际操作中，膜类型、抗体类型、 浓度及抗原特性都影响洗脱难易度。
2. 适用于 ECL 和类似的化学发光试剂进行的Western检测。不适用于非化学发光试剂进行的Western 检测，例如 DAB，NBT/BCIP。
3. 用 ECL显色后，再生液洗脱几分钟后，可再次加入ECL显色液显影，如胶片上显示条带，表明抗体 未除净，须进一步在再生液中浸泡，至胶片上无显色。
4. 使用脱脂奶粉封闭的膜要比使用 BSA 封闭的膜更容易再生。
5. 尽量避免让膜干燥。

储存条件：室温
相关搜索：膜再生液，stripping buffer